 |
 |
 |
 |
Отчет по изучению интерфероногенной активности препарата Флараксин.Институт микробиологии и вирусологии имени Д.К.Заболотного Цель экспериментального исследования Изучить интерферон индуцирующую активность Флараксина в опытах in vitro на белых беспородных мышах /самцы, масса.тела 18-20 г./. Материалы и методы Препарат разводили на 5% растворе глюкозы. Вводили по 0,2 мл внутрибрюшинно, в концентрации 5,50g и 250g на мышь. В качестве контроля использовали известный индуктор интерферона Polу I:C /”Sigma”/, а также 5% раствор глюкозы или физиологический раствор /плацебо/. Через 6, 24, 48 и 72 ч. мьшей декапитировали и получали плазму крови, в которой тестировали уровень интерферона. Кроме того, определяли фактор некроза опухоли. Наличие интерферона определяли по подавлению цитопатогенного действия тест-вируса / вируса везикулярного стоматита шт. Индиана в дозе 100 ЦПД 50/ в культуре перевиваемых клеток L-929 или ПТП, выращенных в 96-луночных культуральных панелях /Linbro/. За титр интерферона принимали величину, обратную разведению пробы, при котором наблюдается 50% защита клеток от цитопатогенного действия тест-вируса. Активность фактора некроза опухоли в плазме определяли по цитолитическому действию на обработанных актиномицином-Д/"Serva"/ клетках мишенях L-929, используя спектрофотометрический тест с кристаллическим фиолетовым /Методические рекомендации, Киев, 1994/ Результаты изучения Результаты определения уровней интерферона представлены в таблице 1. Как следует из таблицы 1, Флараксин обладает интерферогенной активностью. Так доза 5g/мышь уже обладала этой способностью. Однако наиболее оптимальной дозой является 50 g/мышь. При использовании этой дозы уровень интерферона в организме животных наиболее высокий и сохраняется на протяжении длительного периода времени /на протяжении 72 часов/. В то же время все известные индукторы интерферона, и в том числе Pоly І:С, обладают коротким сроком действия при индукции интерферона. Таблица 1. Наличие интерфероноподобной активности в плазме мышей при введении им препарата Флараксина.
Таблица 2. Продукция интерферона спленоцитами мышей, которым предварительно вводили Флараксин /в опытах in vitro/.
Примечание: Здесь и в последующих таблицах приняли следующие условные обозначения: ВБН – вирус Болезни Ньюкасла; ФГА - фитогемаглютинин. Интактные животные - животные контрольной группы, за которыми ведут наблюдения параллельно с подопытными животными. Поэтому свойство Флараксина длительное время поддерживать продукцию интерферона делает его чрезвычайно интересным и перспективным для использования при лечении и профилактике предопухолевых, опухолевых процессов, а также вирусных инфекций ЦНС и, так называемых, медленных вирусных инфекций к которым относится СПИД, рассеянный склероз и др. В другой серии опытов через 24 и 72 часа после введения животным оптимальной дозы препарата / 50 g/мышь /, у животных забирали селезенку, готовили взвесь спленоцитов и изучали функциональные способности иммунокомпетентных клеток к продукции интерферона in vitro, а также определяли тип индуцированного интерферона / IgA или IgG /. Для этого к взвеси спленоцитов добавляли индукторы интерферона -Вирус Болезни Ньюкасла (ВБН) и Фитогемаглютинин (ФГА). Контролем служили спленоциты интактных животных. Результаты этих исследований представлены в Табл.2. Полученные данные свидетельствуют о некотором увеличении способности спленоцитов животных, которым ранее вводили препарат, синтезировать интерферон in vitro под влиянием интерфероногена. Как следует из Табл.2, при использовании в качестве индуктора интерферона Вируса Болезни Ньюкасла (ВБН), т.е. при индукции α-интерферона, синтез α-интерферона увеличивается в 2 раза (если Флараксин вводили за 72 часа до взятия у мышей ceлeзeнки ). При использовании в качестве индуктора интерферона Фитогемаглютинина ФГА (индуктор γ-интерферона) происходит более значительное усиление продукции интерферона - в 4 раза, если вводили Флараксин за 72 часа до взятия у мышей селезенки. Эти данные могут быть использованы для отработки оптимальной схемы введения препарата для лечения. Кроме того, изучали наличие фактора некроза опухоли в плазме животных после введения мышам Флараксина. При этом установлено, что только использование высоких доз препарата (250 g/мышь) приводило к существенному повышению уровня Фактора Некроза Опухолей (ФНО) по сравнению с контролем. Что же касается типа индуцированного интерферона, то он оказался термолабильным (неустойчивым к изменению температуры), что характерно для γ-интерферона, но для окончательного утверждения необходимо провести дополнительные исследования по кислотолабильности (неустойчивость к окислительным процессам) и антигенной специфичности ( способности вызывать синтез антител). ВЫВОДЫ Таким образом, на основании проведенных исследований установлено, что препарат Флараксин обладает интерфероногенной активностью, а также индуцирует в организме образование фактора некроза опухоли. Необходимо проведение дополнительных исследований по определению оптимальных схем введения препарата, учитывая явления гипореактивности (слабая сопротивляемость организма болезням) на частые введения индуктора интерферона. Руководитель исследования:
Popular Co. Ltd. ® suggestions for webmaster dr.dovnar@gmail.com |
 |
|
|
|
HABEPX
Публикации